荧光素酶发光成像是一种广泛应用于生物医学研究的成像技术，其具有较高的灵敏度和选择性，能够在活体内、细胞内以及分子水平上实现可视化成像。本文将从作用、原理、特点以及选型标准四个方面探讨荧光素酶发光成像技术的具体内容。

　　一、作用

　　荧光素酶（Luciferase）是一种广泛存在于生物界的酶类，在一些动物中起到生物荧光作用，荧光素酶发光成像技术利用荧光素酶与荧光素底物（Luciferin）的反应，产生强烈的荧光信号，以实现对目标区域的定量及定位等高分辨率成像。

　　二、原理

　　荧光素酶的反应原理是荧光素底物与ATP在荧光素酶的催化下进行氧化反应，生成二氧化碳、AMP和氧化荧光素，并释放出能量。氧化荧光素激发的荧光光子可以经过吸收器淬灭，也可以导致染料重新激发和发光，之后通过成像设备记录下来。

　　三、特点

　　1、灵敏度

　　荧光素酶发光成像具有较高的检测灵敏度，其能够侦测到相对较弱的荧光发光，能够提供高分辨率的荧光图像。

　　2、高度选择性

　　荧光素酶发光成像对绝大多数背景荧光有很好的区分度，使其可以获得非常高的检测信噪比。

　　3、实时性高

　　荧光素酶发光成像能够以非常高的速度捕捉荧光事件，从而使荧光素酶标记物的变化能够实时呈现在屏幕上。

　　四、选型标准

　　在使用荧光素酶发光成像技术时，应根据实验需求选择合适的荧光素酶种类和底物。

　　1、荧光素酶种类选择

　　荧光素酶有多种不同的种类，应根据实验目的和样本类型选择合适的荧光素酶。例如，Firefly荧光素酶对哺乳动物细胞较为适用，但对欧文斯毒蛇等其它生物的检测灵敏度较低。因此，在选择荧光素酶种类时，应根据实验需求和样本类型选择合适的种类。

　　2、荧光素底物的选择

　　荧光素底物分为自发荧光和非自发荧光两种，应根据实验需求选择合适的荧光素底物。自发荧光底物能够极大提高检测的灵敏度，但在嵌合蛋白的检测中，荧光素底物的自发荧光会对测量的结果产生影响，因此应选择非自发荧光底物。